二維聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)結(jié)合了等電聚焦技術(shù)（根據(jù)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)進(jìn)行分離）以及SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)（根據(jù)蛋白質(zhì)的大小進(jìn)行分離）。這兩項(xiàng)技術(shù)結(jié)合形成的二維電泳是分離分析蛋白質(zhì)*有效的一種電泳手段。
通常**維電泳是等電聚焦，在細(xì)管中（φ1～3 mm）中加入含有兩性電解質(zhì)、8M的脲以及非離子型去污劑的聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行等電聚焦，變性的蛋白質(zhì)根據(jù)其等電點(diǎn)的不同進(jìn)行分離。而后將凝膠從管中取出，用含有SDS的緩沖液處理30 min，使SDS與蛋白質(zhì)充分結(jié)合。
將處理過的凝膠條放在SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳濃縮膠上，加入丙烯酰胺溶液或熔化的瓊脂糖溶液使其固定并與濃縮膠連接。在**維電泳過程中，結(jié)合SDS的蛋白質(zhì)從等電聚焦凝膠中進(jìn)入SDS－聚丙烯酰胺凝膠，在濃縮膠中被濃縮，在分離膠中依據(jù)其分子量大小被分離。
對細(xì)胞提取液進(jìn)行雙向電泳時(shí)可分辨出1000～2000個(gè)蛋白分子，也有報(bào)道說能夠分辨出5000～10000個(gè)蛋白斑點(diǎn)。這些報(bào)道的數(shù)據(jù)與細(xì)胞中正常存在的蛋白分子的數(shù)量很接近，因此可以說蛋白質(zhì)雙向電泳的分辨率較高，可以直接用于檢測細(xì)胞提取物中單個(gè)蛋白分子。
公安機(jī)關(guān)備案號：
