原位檢測試劑盒
*重要的是及時固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC處理，以抑制RNA酶對mRNA的分解作用。此外，過度固定對原位雜交有明顯的不利影響。
1．玻片的處理：一般采用多聚賴氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．細胞在多聚賴氨酸處理的蓋玻片上進行培養(yǎng)，條件為37℃和5%的CO2，所用培養(yǎng)基為 Dulbecco基礎培養(yǎng)基。細胞長好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分鐘×3次。
3．原位檢測試劑盒培養(yǎng)細胞和冰凍切片均可用下述方法固定：固定液為4%多聚甲醛/0.1 M PBS（PH7.2-7.6），含有1/1000 DEPC。室溫固定 20--30分鐘。蒸餾水充分洗滌，干燥后-20℃冰凍可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+純甲醇50份混合，室溫處理30分鐘。蒸餾水洗滌3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%檸檬酸新鮮稀釋的胃蛋白酶（1ml 3% 檸檬酸加2滴濃縮型胃蛋白酶，混勻），37℃或室溫消化5-120秒鐘。有時也可以不消化。原位雜交用 PBS洗3次×5分鐘。蒸餾水洗1次。
6.原位檢測試劑盒后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液為1%多聚甲醛/0.1 M PBS（PH7.2-7.6），含有1/1000 DEPC。室溫固定 10分鐘。蒸餾水洗滌3次。
7. 預雜交：濕盒的準備--干的雜交盒底部加20%甘油20ml以保持濕度。按每張切片20μι加預雜交液。恒溫箱38-42℃2-4小時。吸取多余液體，不洗。
8. 雜交--按每張切片20μι雜交液，加在切片上。將原位雜交專用蓋玻片的保護膜揭開后，蓋在切片上。恒溫箱38-42℃雜交過夜(根據(jù)雜交情況可以調節(jié))。
尊敬的客戶們：您好，我司是一支技術量雄厚的高素質的開發(fā)群體，為廣大用戶提供高品質產品，完整的解決方案和上等的技術服務公司。主要產品有：elisa試劑盒、**組化試劑盒、**組化抗體等。
本企業(yè)堅持以誠信立業(yè)，以品質守業(yè)，以進取興業(yè)的宗旨，以更堅定的步伐不斷攀登新的高峰，歡迎顧客們放心選購產品，我們將竭誠為您服務！