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**熒光標記技術
**熒光技術是利用物質吸收光能后,產生激發態而發光的特性。將具有這種特性的熒光素(異硫氰熒光黃或羅丹明
B200)
用化學方法結合在特異的抗體或抗原上,又不損害其抗體或抗原活性的一種熒光顯微鏡下的示蹤技術??贵w與抗原的結合是高度特異的,所以只要知道其中的一種因子,也就知道了另一種因子。
**熒光技術就是利用上述兩種特性,把不可見的抗原抗體的反應(一抗)與被熒光素標記的抗體(抗抗體)反應,變為肉眼可見的熒光,在熒光顯微鏡下我們所能見到的亮綠熒光,不是標本本身發出的,而是熒光物質受到激發后而發出的亮綠色熒光。
**熒光技術利用了物理、化學、組織學、細胞學、生物學等綜合性技術,可以檢查多種抗原抗體復合物,只要知道一種抗體或抗原,就可以知道其對應的抗原或抗體。
三、**熒光抗體技術可分為直接法、間接法和補體法三種類型。直接法只有抗原、抗體兩個因子直接參與反應,利用熒光標記的特異性抗體與相應的抗原結合,以此來鑒定未知抗原,此方法的優點是簡單快速,特異性高,非特異性反應少。但一種熒光標記抗體只能針對一種抗原,敏感性較差和不能檢查未知抗體。間接法是利用熒光標記抗**球蛋白抗體(抗抗體),鑒定未知抗原或抗體。補體法是利用熒光標記抗補體抗體,以鑒定未知抗原或抗體,是補體結合反應的原理。此方法只需要一種熒光標記抗補體抗體,就可以檢查所有種系的抗原抗體系統。因為補體可被任何哺乳類的抗體抗原系統所固定,并與間接法有同樣的優點。但是這種方法中的補體不穩定,熒光標記抗補體抗體不能與之固定的補體結合,使試驗失敗,而且非特異性熒光也比較強。
熒光抗體技術已廣泛應用于醫學和生物學的很多方面,在臨床**學中主要用于在**診斷、寄生蟲學診斷、病毒學診斷、**病理方面的診斷、血液中
B
及
T
細胞的鑒定、**和酶的局部組織定位、一些器官移植抗原鑒定、組織中**球蛋及補體組分的檢測及自身**病等方面。
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